ຜະລິດຕະພັນ

ທາດໂປຼຕີນ ORF45 ຂອງພະຍາດ herpesvirus ທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບ sarcoma ຂອງ Kaposi (KSHV) ແມ່ນທາດໂປຼຕີນຈາກ gammaherpesvirus ສະເພາະໃນທັນທີທັນໃດ-early tegument.ການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາໄດ້ເປີດເຜີຍບົດບາດສໍາຄັນຂອງມັນຢູ່ໃນທັງສອງໄລຍະຕົ້ນແລະໄລຍະທ້າຍຂອງການຕິດເຊື້ອ KSHV.ໃນການສຶກສານີ້, ພວກເຮົາໄດ້ສໍາຫຼວດການໂຕ້ຕອບຂອງ ORF45 ໂດຍໃຊ້ກະດານຂອງພູມຕ້ານທານ monoclonal.ນອກເໜືອໄປຈາກໂປຣຕີນທີ່ຄວບຄຸມ kinase extracellular (ERK) ແລະ p90 ribosomal S6 kinase (RSK) ທີ່ໄດ້ລະບຸໄວ້ກ່ອນໜ້ານີ້, ພວກເຮົາພົບເຫັນໂປຣຕີນທີ່ copurified ອື່ນໆຫຼາຍຊະນິດ, ລວມທັງໂປຣຕີນທີ່ໂດດເດັ່ນຂອງ ∼38 kDa ແລະ ∼130 kDa.Mass spectrometry ເປີດເຜີຍວ່າທາດໂປຼຕີນຈາກ 38-kDa ແມ່ນເຊື້ອໄວຣັສ ORF33 ແລະທາດໂປຼຕີນ 130-kDa ແມ່ນ cellular USP7 (ubiquitin-specific protease 7).ພວກເຮົາໄດ້ສ້າງແຜນທີ່ຂອງໂດເມນທີ່ຜູກມັດ ORF33 ກັບອາຊິດ amino carboxyl-terminal 19 ທີ່ມີການອະນຸລັກສູງຂອງ ORF45 ແລະໂດເມນທີ່ຜູກມັດ USP7 ກັບ motif ທີ່ເປັນເອກະສັນກັນທີ່ໄດ້ລາຍງານຢູ່ໃນເຂດພາກກາງຂອງ ORF45.ການນໍາໃຊ້ການຍັບຍັ້ງ immunofluorescence, ພວກເຮົາໄດ້ສັງເກດເຫັນ colocalization ຂອງ ORF45 ກັບ ORF33 ຫຼື USP7 ທັງພາຍໃຕ້ການຕິດເຊື້ອ ions ແລະຢູ່ໃນຈຸລັງທີ່ຕິດເຊື້ອ KSHV.ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ພວກເຮົາສັງເກດເຫັນການຍົກຍ້າຍທີ່ຂຶ້ນກັບ ORF45 ຂອງສ່ວນຫນຶ່ງຂອງ ORF33 / USP7 ຈາກແກນໄປຫາ cytoplasm.ພວກເຮົາພົບວ່າ ORF45 ເຮັດໃຫ້ເກີດການເພີ່ມຂື້ນຂອງການສະສົມທາດໂປຼຕີນຈາກ ORF33 ທີ່ຖືກຍົກເລີກຖ້າໂດເມນທີ່ຜູກມັດ ORF33- ຫຼື USP7 ໃນ ORF45 ຖືກລຶບຖິ້ມ.ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ການລຶບລ້າງ carboxyl terminus ທີ່ຖືກອະນຸລັກຂອງ ORF45 ໃນ KSHV genome ຫຼຸດລົງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນລະດັບຂອງໂປຣຕີນ ORF33 ໃນຈຸລັງທີ່ຕິດເຊື້ອ KSHV ແລະຍົກເລີກການຜະລິດ virions progeny.ໂດຍລວມແລ້ວ, ຜົນໄດ້ຮັບຂອງພວກເຮົາບໍ່ພຽງແຕ່ເປີດເຜີຍສ່ວນປະກອບໃຫມ່ຂອງ ORF45 interactome, ແຕ່ຍັງສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າປະຕິສໍາພັນລະຫວ່າງທາດໂປຼຕີນເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບການ replication KSHV lytic.Kaposi ຂອງ sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) ແມ່ນຕົວແທນສາເຫດຂອງມະເຮັງຂອງມະນຸດຈໍານວນຫນຶ່ງ.KSHV ORF45 ແມ່ນທາດໂປຼຕີນທີ່ມີປະໂຫຍດຫຼາຍທີ່ຕ້ອງການສໍາລັບການຈໍາລອງ KSHV lytic, ແຕ່ກົນໄກທີ່ແນ່ນອນທີ່ ORF45 ປະຕິບັດຫນ້າທີ່ທີ່ສໍາຄັນຂອງມັນແມ່ນບໍ່ຈະແຈ້ງ.ການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາໄດ້ເປີດເຜີຍວ່າ ORF45 pr otein ທັງຫມົດໃນຈຸລັງມີຢູ່ໃນສະລັບສັບຊ້ອນທີ່ມີນ້ໍາຫນັກໂມເລກຸນສູງ.ດັ່ງນັ້ນພວກເຮົາຈຶ່ງຊອກຫາລັກສະນະການໂຕ້ຕອບຂອງ ORF45 ເພື່ອໃຫ້ຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບບົດບາດຂອງມັນໃນລະຫວ່າງການຈໍາລອງແບບ lytic.ໂດຍໃຊ້ກະດານຂອງພູມຕ້ານທານ monoclonal, ພວກເຮົາໄດ້ສໍາຫຼວດການໂຕ້ຕອບ ORF45 ໃນຈຸລັງທີ່ຕິດເຊື້ອ KSHV.ພວກເຮົາໄດ້ກໍານົດສອງຄູ່ຮ່ວມງານຜູກມັດໃຫມ່ຂອງ ORF45: ໂປຣຕີນໄວຣັສ ORF33 ແລະ protease ສະເພາະຂອງເຊນລູລາ ubiquitin 7 (USP7).ພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນຕື່ມອີກວ່າປະຕິສໍາພັນລະຫວ່າງ ORF45 ແລະ ORF33 ແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບການຜະລິດປະສິດທິພາບຂອງອະນຸພາກໄວຣັສ KSHV, ແນະນໍາວ່າການແຊກແຊງເປົ້າຫມາຍດັ່ງກ່າວອາດຈະເປັນຕົວແທນຂອງຍຸດທະສາດໃຫມ່ເພື່ອຍັບຍັ້ງ KSHV lytic replication.