ຜະລິດຕະພັນ

ຄວາມເຂົ້າໃຈທາງດ້ານກົນໄກໃນຄອບຄົວທີ່ຂຶ້ນກັບ Ca2+ ຂອງ alpha-mannosidases ໃນ symbiont ລໍາໄສ້ຂອງມະນຸດ.

ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍຈໍ້າສອງເມັດ, ເປັນຕົວຢ່າງໂດຍ Bacteroides thetaiotaomicron, ມີບົດບາດສໍາຄັນໃນການຮັກສາສຸຂະພາບຂອງມະນຸດໂດຍການໃຊ້ຄອບຄົວຂະຫນາດໃຫຍ່ຂອງ glycoside hydrolases (GHs) ເພື່ອຂຸດຄົ້ນ polysaccharides ອາຫານແລະເປັນເຈົ້າພາບ glycans ເປັນສານອາຫານ.ການຂະຫຍາຍຄອບຄົວ GH ດັ່ງກ່າວແມ່ນເປັນຕົວຢ່າງໂດຍ 23 ຄອບຄົວ GH92 glycosidases ທີ່ເຂົ້າລະຫັດໂດຍ genome B. thetaiotaomicron.ໃນທີ່ນີ້ພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນ alpha-mannosidases ທີ່ປະຕິບັດໂດຍຜ່ານກົນໄກການໂຍກຍ້າຍດຽວເພື່ອນໍາໃຊ້ເຈົ້າພາບ N-glycans.ໂຄງສ້າງສາມມິຕິຂອງສອງ GH92 mannosidases ກໍານົດຄອບຄົວຂອງໂປຣຕີນສອງໂດເມນທີ່ສູນ catalytic ຕັ້ງຢູ່ໃນການໂຕ້ຕອບໂດເມນ, ສະຫນອງອາຊິດ (glutamate) ແລະ base (aspartate) ການຊ່ວຍເຫຼືອ hydrolysis ໃນ Ca(2+)-. ວິ​ທີ​ການ​ຂຶ້ນ​.ໂຄງສ້າງສາມມິຕິລະດັບຂອງ GH92s ໃນສະລັບສັບຊ້ອນທີ່ມີ inhibitors ສະຫນອງຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບສະເພາະ, ກົນໄກແລະ conformational itinerary ຂອງ catalysis.Ca(2+) ມີບົດບາດສຳຄັນໃນການຊ່ວຍບິດເບືອນ mannoside ອອກຈາກສະຖານະຂອງພື້ນດິນ (4)C(1) ການສອດຄ່ອງຂອງເກົ້າອີ້ໄປສູ່ການຫັນປ່ຽນ. (ບັນນານຸກົມ: Nat.ເຄັມ.ຊີວະພາບ.6, 125-32, (2010)

ໂຄມາຕາພາບຄວາມສຳພັນທາງໜ້າຂອງ ovalbumin glycoasparagines ໃນຖັນ concanavalin A-sepharose.ການ​ສຶກ​ສາ​ປະ​ລິ​ມານ​ຂອງ​ການ​ຜູກ​ມັດ​ສະ​ເພາະ​ຂອງ Lectin ໄດ້​.

ປະຕິສໍາພັນຂອງ Sepharose 4B-immobilized concanavalin A (ConA) ກັບ 10 glycoasparagines ທີ່ມາຈາກ ovalbumin ໄດ້ຖືກສືບສວນໃນປະລິມານໂດຍ chromatography affinity frontal.ໃນວິທີການນີ້, ການແກ້ໄຂຄາໂບໄຮເດດແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງກັບຖັນ ConA-Sepharose ແລະການຊັກຊ້າຂອງຫນ້າ elution ແມ່ນວັດແທກເປັນຕົວກໍານົດຂອງຄວາມເຂັ້ມແຂງຂອງການໂຕ້ຕອບ.ຄົງທີ່ dissociation (Kd) ສໍາລັບແຕ່ລະ saccharide ກັບ ConA ສາມາດຖືກກໍານົດ.ການວິເຄາະການຜູກມັດຂອງ p-nitrophenyl-alpha, D-mannoside ໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຄຸນສົມບັດການຜູກມັດຂອງ ConA ບໍ່ມີການປ່ຽນແປງທີ່ສໍາຄັນຫຼັງຈາກ immobilization ໃນ Sepharose 4B.ແຕ່ລະຂອງ ovalbumin glycoasparagines ໄດ້ຖືກຕິດສະຫຼາກດ້ວຍ tritium ໂດຍວິທີການ reductive methylation ສໍາລັບການວິເຄາະ.ການປຽບທຽບຂອງຄ່າ Kd ທີ່ໄດ້ຮັບສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການຜູກມັດຂອງ ConA ແຕກຕ່າງກັນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍກັບຄວາມແຕກຕ່າງຂອງໂຄງສ້າງເລັກນ້ອຍຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ glycosyl.ຜົນໄດ້ຮັບຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າ ConA ຮັບຮູ້ໂຄງສ້າງລະບົບຕ່ອງໂສ້ glycosyl ສະເພາະ, Man alpha 1-6 (Man alpha 1-3)Man, ເຊິ່ງຢ່າງຫນ້ອຍຫນຶ່ງກຸ່ມ hydroxyl ຢູ່ຕໍາແຫນ່ງ C-3 ຂອງ mannose ເຊື່ອມຕໍ່ C-6 ຄວນຈະບໍ່ເສຍຄ່າ.