ຜະລິດຕະພັນ

Monogalactopyranosides ຂອງ fluorescein ແລະ fluorescein methyl ester: ການສັງເຄາະ, hydrolysis enzymatic ໂດຍ biotnylated β-galactosidase, ແລະການກໍານົດຄ່າສໍາປະສິດການແຜ່ກະຈາຍການແປພາສາ

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) ແລະ d-glucopyranoside) ແລະ methyl ester (MFMG) ຂອງເຂົາເຈົ້າໄດ້ຖືກກະກຽມຈາກ acetobromoglucose / galactose ແລະ fluorescein methyl ester ໃນຜົນຜະລິດທີ່ດີ.ການທົດລອງ hydrolysis enzymatic (ໃຊ້ biotinylated β-galactosidase) ຂອງອະນຸພັນ galacto ໄດ້ຖືກປະຕິບັດແລະຕົວກໍານົດການ kinetic ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່.ການເພີ່ມຂຶ້ນ 15-20 ເທົ່າຂອງຄວາມເຂັ້ມ fluorescence ໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນໃນລະຫວ່າງການ hydrolysis.ການເພີ່ມຂື້ນຂອງ fluorescence ທີ່ເປັນເສັ້ນໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນໃນເວລາສັ້ນໆແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງສານຍ່ອຍຕ່ໍາ, ເຮັດໃຫ້ທາດປະສົມເຫຼົ່ານີ້ມີປະໂຫຍດແລະມີຄວາມອ່ອນໄຫວຕໍ່ probes ສໍາລັບ galactosidases.ຂະໜາດຂອງຄ່າຄົງທີ່ຂອງ Michaelis-Menten (Km) ສໍາລັບ MFMG ແມ່ນສູງກວ່າທີ່ FMG ຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງການປ່ຽນແປງທີ່ອາດເປັນໄປໄດ້ຂອງຊັ້ນຍ່ອຍ fluorogenic.ມູນຄ່າກິໂລແມັດສໍາລັບການ biotinylated β-Gal ກັບ FMG ແມ່ນຕ່ໍາກວ່ານັ້ນສໍາລັບ enzyme ພື້ນເມືອງ.ການສັງເກດການນີ້ຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມໃກ້ຊິດຂອງຊັ້ນຍ່ອຍທີ່ສູງຂຶ້ນຂອງ enzyme biotinylated ໃນການປຽບທຽບກັບ enzyme ພື້ນເມືອງ.ຄ່າສໍາປະສິດການແຜ່ກະຈາຍການແປພາສາໄດ້ຖືກວັດແທກ, ສໍາລັບທັງສອງ substrates fluorogenic ແລະທັງສອງຜະລິດຕະພັນ, ຈ້າງ fluorescence spectroscopy correlation.ຄ່າສໍາປະສິດການແຜ່ກະຈາຍການແປພາສາສໍາລັບ substrates fluorogenic ແລະຜະລິດຕະພັນ hydrolysis enzymatic ໄດ້ຖືກວັດແທກໃຫ້ຄ້າຍຄືກັນ, ໃນຂອບເຂດຂອງ 3.5–4.5 × 10–10 m2 s−1.ດັ່ງນັ້ນ, ການປັບປຸງຫຼືການຊັກຊ້າຂອງ kinetics enzymatic ເນື່ອງຈາກຄວາມແຕກຕ່າງໃນການເຄື່ອນຍ້າຍການແປຂອງ substrate ແລະຜະລິດຕະພັນແມ່ນບໍ່ປາກົດຂື້ນ.