ຜະລິດຕະພັນ

ລັກສະນະທີ່ຜົນກະທົບຂອງການກາຍພັນພ້ອມໆກັນປະສົມປະສານກັບການປ່ຽນແປງກິດຈະກໍາຂອງ enzymatic ແມ່ນບໍ່ສາມາດຄາດເດົາໄດ້ງ່າຍໆເພາະວ່າຜົນກະທົບເຫຼົ່ານີ້ບໍ່ແມ່ນການເພີ່ມໃນລັກສະນະເສັ້ນສະ ເໝີ ໄປ.ເພາະສະນັ້ນ, ຄຸນລັກສະນະຂອງຜົນກະທົບຂອງການກາຍພັນພ້ອມໆກັນຂອງສານຕົກຄ້າງອາຊິດ amino ທີ່ຜູກມັດ substrate ສາມາດເຮັດໃຫ້ການປະກອບສ່ວນທີ່ສໍາຄັນຕໍ່ຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບຄວາມສະເພາະຂອງ substrate ຂອງ enzymes.ໃນ beta-glycosidase ຈາກ Spodoptera frugiperda (Sfbetagly), ທັງສອງ residues Q39 ແລະ E451 ພົວພັນກັບ substrate ແລະນີ້ເປັນສິ່ງຈໍາເປັນສໍາລັບການກໍານົດສະເພາະ substrate.mutants ສອງເທົ່າຂອງ Sfbetagly (A451E39, S451E39 ແລະ S451N39) ໄດ້ຖືກກະກຽມໂດຍການ mutagenesis ໂດຍກົງຈາກສະຖານທີ່, ສະແດງອອກໃນເຊື້ອແບັກທີເຣັຍແລະ purified ໂດຍໃຊ້ affinity chromatography.enzymes ເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນມີລັກສະນະການນໍາໃຊ້ p-nitrophenyl beta-galactoside ແລະ p-nitrophenyl beta-fucoside ເປັນ substrates.ອັດຕາສ່ວນ k cat/Km ສຳລັບການກາຍພັນແບບດ່ຽວ ແລະຄູ່ຂອງ Sfbetagly ທີ່ບັນຈຸການກາຍພັນທີ່ກຳນົດທິດທາງເວັບໄຊຢູ່ຕຳແໜ່ງ Q39 ແລະ E451 ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຜົນກະທົບຂອງພະລັງງານຟຣີຂອງ ESdouble dagger (enzyme-transition state complex) ຂອງການກາຍພັນຄູ່ (Gdouble daggerxy) ບໍ່ແມ່ນຜົນລວມຂອງຜົນກະທົບທີ່ເກີດຈາກການກາຍພັນອັນດຽວ (Gdouble daggerx ແລະ Gdouble daggery).ຄວາມແຕກຕ່າງນີ້ຢູ່ໃນ Gdouble dagger ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າຜົນກະທົບຂອງການກາຍພັນດຽວແມ່ນຊ້ອນກັນບາງສ່ວນ.ເພາະສະນັ້ນ, ຜົນກະທົບທົ່ວໄປນີ້ນັບພຽງແຕ່ຄັ້ງດຽວໃນ Gdouble daggerxy.ຂໍ້ມູນ crystallographic ກ່ຽວກັບ beta-glycosidases ເປີດເຜີຍການປະກົດຕົວຂອງພັນທະບັດ hydrogen bidentate ທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບ residues Q39 ແລະ E451 ແລະກຸ່ມ hydroxyl ດຽວກັນຂອງ substrate.ດັ່ງນັ້ນ, ທັງຂໍ້ມູນ thermodynamic ແລະ crystallographic ແນະນໍາວ່າ residues Q39 ແລະ E451 ມີອິດທິພົນເຊິ່ງກັນແລະກັນກ່ຽວກັບປະຕິສໍາພັນຂອງເຂົາເຈົ້າກັບ substrate.