ຜະລິດຕະພັນ

ເພື່ອສ້າງປະລິມານການເຜົາຜານອາຫານຫຼາຍອັນສະເພາະຂອງ 5-fluorouracil (5-FU) ແລະສອງທາດ monophosphate nucleotides endogenous, ພວກເຮົາໄດ້ພັດທະນາວິທີການຕົ້ນສະບັບໂດຍອີງຕາມການວັດແທກມວນສານໂຄຣມາຕາກຣາຊີ-ຂອງແຫຼວ (LC-MS/MS).ການທົດສອບນີ້ອະນຸຍາດໃຫ້ກໍານົດຂອງ: (i) ການຜະລິດພາຍໃນຈຸລັງຂອງ 5-fluoro-2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (5-FdUMP) ຈາກ 5-FU ຫຼື 5-fluoro-2′-deoxyuridine (5-FdUrd) . 5-FU ຈາກຈຸລັງການລ້ຽງຂອງມະນຸດໂດຍຜູ້ຂົນສົ່ງ ABC.ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການທົດລອງຂອງພວກເຮົາ, ຈຸລັງໄດ້ຖືກອົບດ້ວຍ 5-FU ຫຼື 5-FUrd.ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ທາດໂປຼຕີນຈາກຈຸລັງໄດ້ຖືກ precipitated ໂດຍ methanol.ຂັ້ນຕອນນີ້ສະຫນອງການຟື້ນຟູການສະກັດເອົາສູງ.ນອກຈາກນັ້ນ, ເພື່ອວັດແທກຄວາມລັບຂອງ 5-FU ແລະ 5-FdUMP ຈາກຈຸລັງ, ພວກເຮົາໄດ້ປະຕິບັດການກໍານົດປະລິມານຂອງໂມເລກຸນເຫຼົ່ານີ້ຢູ່ໃນວັດທະນະທໍາກາງ.ສື່ໄດ້ຖືກສີດໂດຍກົງ (5-FU) ຫຼືພາຍໃຕ້ການສະກັດເອົາໄລຍະແຂງໂດຍໃຊ້ Oasis Wax extraction cartridge (5-FdUMP).ການແຍກການວິເຄາະໄດ້ຖືກປະຕິບັດຢູ່ໃນຖັນ dC18 Atlantis 3.5 μm, (100 mm × 2.1 mm id) ຖັນທີ່ມີຮູບແບບ isocratic ໂດຍໃຊ້ ammonium formate buffer/methanol/water (5/5/90, v/v) ເປັນໄລຍະມືຖື.ໄລຍະເວລາແລ່ນບໍ່ເກີນ 6.2 ນາທີ.ການວິເຄາະໄດ້ຖືກ ionized ໃນການໂຕ້ຕອບ electrospray ພາຍໃຕ້ຮູບແບບ ion ລົບ.ພວກ​ເຮົາ​ໄດ້​ກວດ​ສອບ​ວິ​ທີ​ການ​ໃນ​ໄລ​ຍະ 2.5–150 ng mL −1 ຕາມ​ທາດ​ປະ​ສົມ​.ຄວາມຜັນຜວນພາຍໃນ ແລະລະຫວ່າງການກວດສອບແມ່ນຕໍ່າກວ່າ 10% ໃນໄລຍະເຈັດມື້.ທາດປະສົມທັງໝົດມີຄວາມຄົງຕົວຢູ່ໃນເຊລ ຫຼື ຢູ່ໃນວັດທະນະທັມ ເມື່ອເກັບຕົວຢ່າງໄວ້ທີ່ −20 °C ເປັນເວລາຢ່າງໜ້ອຍສອງອາທິດ, ແລະຫຼັງຈາກສາມຮອບວຽນແຊ່ແຂງ.ບໍ່ໄດ້ສັງເກດເຫັນຜົນກະທົບຂອງ matrix ໃນທັງສອງສື່.