ຜະລິດຕະພັນ

ຄ້າຍຄືກັນກັບໄວຣັສ RNA ທີ່ເປັນສາຍບວກອື່ນໆ, ໄວຣັສ tombus ແມ່ນ replicated ໂດຍ membrane-bound viral replicase complex (VRC).VRC ປະກອບດ້ວຍ p92 virus-coded RNA polymerase (RdRp), viral p33 RNA chaperone, ແລະໂປຣຕີນທີ່ເປັນເຈົ້າພາບຮ່ວມກັນຫຼາຍອັນ.ເພື່ອກາຍເປັນ RdRp ທີ່ເປັນປະໂຫຍດຫຼັງຈາກການແປຂອງມັນ, p92 replication protein ຄວນຖືກລວມເຂົ້າໃນ VRC, ປະຕິບັດຕາມໂດຍການເປີດໃຊ້ຂອງມັນ.ພວກເຮົາໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນໃນເມື່ອກ່ອນໃນການທົດສອບການສະກັດຈາກເຊື້ອລາທີ່ບໍ່ມີເຊນທີ່ວ່າການກະຕຸ້ນເຊື້ອໄວຣັສ Tomato bushy stunt (TBSV) RdRp ຕ້ອງການປັດໄຈໂຮດທີ່ລະລາຍ.ໃນບົດຄວາມນີ້, ພວກເຮົາກໍານົດທາດໂປຼຕີນຈາກຄວາມຮ້ອນຂອງເຊນລູລາ 70 (Hsp70) ເປັນປັດໄຈເຈົ້າພາບຮ່ວມກັນທີ່ຕ້ອງການສໍາລັບການກະຕຸ້ນຂອງ N-terminally truncated recombinant TBSV RdRp.ນອກຈາກນັ້ນ, ການຂັດຂວາງການທໍາງານຂອງ Hsp70 ທີ່ອີງໃສ່ໂມເລກຸນຂະຫນາດນ້ອຍຍັບຍັ້ງການສັງເຄາະ RNA ໂດຍ tombusvirus RdRp ໃນ vitro.ນອກຈາກນັ້ນ, ພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ phospholipids ທີ່ເປັນກາງ, ຄື, phosphatidylethanolamine (PE) ແລະ phosphatidylcholine (PC), ເສີມຂະຫຍາຍການກະຕຸ້ນ RdRp ໃນ vitro.ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, phosphatidylglycerol (PG) ສະແດງໃຫ້ເຫັນຜົນກະທົບ inhibitory ທີ່ເຂັ້ມແຂງແລະເດັ່ນໃນການກະຕຸ້ນໃນ vitro RdRp.ພວກເຮົາຍັງສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ PE ແລະ PC ກະຕຸ້ນປະຕິສໍາພັນ RdRp-viral plus-strand RNA [(+)RNA], ໃນຂະນະທີ່ PG ຍັບຍັ້ງການຜູກມັດຂອງໄວຣັສ RNA ກັບ RdRp.ອີງຕາມບົດບາດການກະຕຸ້ນທຽບກັບ inhibitory ຂອງ phospholipids ຕ່າງໆໃນການກະຕຸ້ນ tombusvirus RdRp, ພວກເຮົາສະເຫນີວ່າອົງປະກອບ lipid ຂອງເຍື່ອ subcellular ເປົ້າຫມາຍອາດຈະຖືກນໍາໃຊ້ໂດຍ tombusviruses ເພື່ອຄວບຄຸມການປະກອບ VRC ໃຫມ່ໃນໄລຍະການຕິດເຊື້ອ. The virus-coded RNA-dependent RNA polymerase (RdRp), ເຊິ່ງຮັບຜິດຊອບໃນການສັງເຄາະເຊື້ອໄວຣັດ RNA ໃນຈຸລັງທີ່ຕິດເຊື້ອຂອງໄວຣັດ RNA ທີ່ເປັນສາຍບວກຫຼາຍຊະນິດ, ໃນເບື້ອງຕົ້ນແມ່ນບໍ່ເຄື່ອນໄຫວ.ຍຸດທະສາດນີ້ມີແນວໂນ້ມທີ່ຈະຫຼີກເວັ້ນການສັງເຄາະ RNA ໄວຣັສໃນ cytosol ທີ່ຈະນໍາໄປສູ່ການກະຕຸ້ນການຕອບໂຕ້ຕ້ານໄວຣັດຂອງເຊນ cellular RNA ຢ່າງໄວວາ.ໃນລະຫວ່າງການປະກອບຂອງສະລັບສັບຊ້ອນການຈໍາລອງເຍື່ອທີ່ຜູກມັດ, RdRp ໄວຣັດຈະເປີດໃຊ້ໂດຍຜ່ານຂະບວນການທີ່ເຂົ້າໃຈບໍ່ຄົບຖ້ວນທີ່ເຮັດໃຫ້ RdRp ສາມາດສັງເຄາະ RNA ໄດ້.ໂດຍການນໍາໃຊ້ TBSV RdRp, ພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ Hsp70 chaperone cellular ແລະ phospholipids ທີ່ເປັນກາງຊ່ວຍອໍານວຍຄວາມສະດວກໃນການເປີດໃຊ້ RdRp ໃນ vitro.ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, phosphatidylglycerol (PG) ມີຜົນກະທົບ inhibitory ເດັ່ນໃນການກະຕຸ້ນໃນ vitro RdRp ແລະປະຕິສໍາພັນ RdRp-viral RNA, ແນະນໍາວ່າ microdomain membranous ອ້ອມຂ້າງ RdRp ມີຜົນກະທົບຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຕໍ່ຄວາມສາມາດຂອງຕົນສໍາລັບການສັງເຄາະ RNA.ດັ່ງນັ້ນ, ການກະຕຸ້ນຂອງໄວຣັສ RdRp ອາດຈະຂຶ້ນກັບອົງປະກອບເຈົ້າພາບຫຼາຍອັນໃນຈຸລັງທີ່ຕິດເຊື້ອ.